Шта треба узети у обзир када бирате прави микроскоп за систем за снимање живих ћелија

За успешно извођење експеримената са сликама са живим ћелијама, коришћење правог приступа је кључно. Приликом одабира одговарајућег микроскопа за снимање ваших живих ћелија, треба узети у обзир следеће аспекте: одрживост узорка, брзину стицања слике (временска резолуција) и потребну резолуцију у све три димензије.

During live cell imaging, certain environmental conditions must be maintained to avoid detrimental physiological changes. In order to capture physiologically relevant cellular dynamics, live cell experiments require specific environmental conditions, including temperature, pH (via CO2), and humidity control. Furthermore, some experiments may even require hypoxic conditions. Modern incubation systems not only tightly control environmental conditions, they can also provide detailed data reports and alert users to temperature, gas, or humidity variations during the course of an imaging experiment. To minimize or avoid the effects of photodamage, getting the right balance between sensitive detection, accurate label separation (if using >1 ознака) и најнижа доза светлости за ексцитацију је кључна.

За експерименте са живим ћелијама, аквизиција велике брзине је често критична, посебно за проучавање брзих динамичких процеса као што је посматрање везикула. Коришћење оптичких филтера доводи до ограничења брзине због потребе за секвенцијалним сликањем када се мења сет филтера за сваку боју, који се користи за проучавање интеракције више компоненти. Скупљање слика узастопно захтева више времена него истовремено прикупљање слике и, као резултат, могу се пропустити брзи покрети узорка током аквизиције, пошто свака боја има дужи временски интервал од једне слике до друге. Поврх свега, када је директно поређење између две или више боја од суштинског значаја, сигнали су се можда кретали чак и између појединачних аквизиција флуорофора, што компликује интерпретацију података.

Доступно је више технологија за добијање слика у 3 димензије током времена. Избор система зависи од вашег експеримента и од тога да ли је већа брзина или мање осветљење узорка током снимања ваш приоритет при добијању жељене 3Д резолуције. Избор најприкладнијег система традиционално је од вас захтевао да направите избор између система за снимање живих ћелија базираног на камери или конфокалног система за снимање живих ћелија, међутим савремена решења могу да обезбеде оба модалитета на интегрисан начин.